分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 石墨烯（graphene）作为一种新兴产物在生物医学领域的应用越来越广阔，氧化石墨烯( graphene oxide， GO)作为石墨烯的重要衍生物之一，得益于其异源的电学结构，因而在一定波长范围内可以产生荧光。正是这一性能使得GO在生物医学领域有着巨大的潜力，本文主要介绍了近年来GO的荧光性能在分子检测、疾病诊断、细胞成像等方面的应用，并展望了其发展前景。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： ）[Lipoprotein(a), Lp(a)]中载脂蛋白（a）[Apolipoprotein(a), Apo(a)]与Plg高度的同源性，本研究拟证明Lp(a)是否会与重组表达的PE（rPE）结合。方法：原核表达并纯化rPE及敲除C末端两个赖氨酸残基的rPEΔKK，密度梯度离心结合阴离子交换层析分离人血浆Lp(a)，通过ELISA、Pull down、Western blot等方法研究rPE与Lp(a)的相互作用。结果：rPE与Lp(a)结合，但不与LDL结合，且rPEΔKK与Lp(a)的结合能力明显低于rPE；赖氨酸类似物6-氨基乙酸（EACA）能有效抑制rPE与Lp(a)的结合；Lp(a)对rPE与Plg的结合具有微弱的抑制作用。结论：rPE能够与Lp(a)结合，其中rPE的C末端赖氨酸残基和Apo(a)的赖氨酸结合位点（Lysine binding sites, LBS）是rPE与Lp(a)结合的主要位点。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 干旱是最重要的环境胁迫，香蕉MaASR1基因在植物响应逆境胁迫时发挥着重要作用，为了深入研究MaASR1基因的过表达使拟南芥抗旱的分子机制，利用全基因组表达芯片来广谱的筛选MaASR1基因转入后自然条件下及干旱处理条件下差异基因的表达情况。对基因芯片的结果进行了详细的生物信息学分析及相关基因的RT-PCR验证，结果表明MaASR1基因异源表达的拟南芥株系在自然生长条件下共有747个差异基因，其中上调基因559个，下调基因188个；在干旱胁迫条件下共得到653个差异基因，其中上调基因256个，下调基因397个；MaASR1基因的转入可以通过影响激素，光合作用，锌指蛋白及不依赖ABA途径的DREB2A等相关基因的表达来提高拟南芥的抗旱性。为解析MaASR1基因作为转录因子提高植物抗旱能力的分子机制奠定基础。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：克隆一种季也蒙毕赤酵母菌的尿酸酶蛋白编码基因，并通过重组表达和表征进行确认。方法：测定酵母细胞株C.G.M.C.C 2.1008的rRNA序列鉴定其所属种，串联质谱分析此天然尿酸酶肽段序列搜索同源蛋白，测定转录组验证其诱导表达属性，据季也蒙毕赤酵母ATCC 6260基因组信息推断所得尿酸酶(Uniprot id: A5DFP1)的编码序列设计引物，从C.G.M.C.C 2.1008细胞株cDNA中PCR扩增尿酸酶基因，测序后再克隆至定向表达载体pDE1及pDE2中构建带6His标签的重组表达质粒pDE1-MGU和pDE2-MGU，同时构建无6His标签的表达质粒R-MGU。在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达此真菌尿酸酶，SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS测定肽段分子量，以尿酸为底物测定其动力学参数及抑制剂敏感性等性质，并与天然尿酸酶进行比较。结果：rRNA序列表明此菌株为季也蒙毕赤酵母，串联质谱分析胰蛋白酶解肽段表明此天然真菌尿酸酶与尿酸酶A5DFP1高度相似，转录组测序支持此尿酸酶基因高效诱导表达。用所设计引物经PCR从cDNA快速获得编码序列，T载体测序显示其与A5DFP1编码序列仅在第435位碱基不同但氨基酸仍相同。SDS-PAGE发现重组R-MGU肽段约35kDa；MALDI-TOF-MS发现其肽段约17.43kDa且与天然酶一致，但按氨基酸序列计算分子量仅33.98 kDa，表明其可能存在化学修饰。重组表达带6His标签尿酸酶纯化后比活性接近6.0 U/mg；R-MGU米氏常数、代表抑制剂的抑制常数及分子量与天然尿酸酶无差别，但R-MGU很难纯化，使其相同条件下的热稳定性比纯化天然酶略差。结论：成功克隆了一种季也蒙毕赤酵母菌的尿酸酶，并实现其活性形式的重组表达。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 厌氧发酵产氢不仅可以处理有机废物，同时可以获得清洁能源，实现了废物资源化利用。因此综述了暗发酵产氢种泥预处理方法的发展以及种泥预处理和发酵温度对产氢的影响，并对该研究方向提出了展望。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 为研究胭脂萝卜花青素的提取工艺，考察了液料比、浸提温度、浸提时间、超声功率、超声时间对花青素提取率的影响。采用MTT实验、细胞侵袭实验研究了花青素对人胃癌细胞NCI-N87增殖、侵袭的作用，进一步用免疫印迹分析其对HER2信号通过的影响。结果表明，结合响应面分析得出胭脂萝卜花青素最佳提取工艺为：以1%盐酸乙醇为提取剂，液料比10:1，40℃浸提2h，400w超声波破碎15min，在此条件下，花青素的最高提取量为3.92mg/g。30μg/mL的胭脂萝卜花青素能显著抑制NCI-N87细胞的增殖和侵袭能力，同时抑制HER2蛋白及Akt的磷酸化水平。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：研究STAT3在肝癌细胞SK-Hep1对sorafenib抗性中的作用，并探讨STAT3基因沉默在增强sorafenib肝癌疗效中的作用。 方法：应用基于shRNA的基因沉默技术在肝癌细胞SK-Hep1中敲减STAT3；用CCK8法检测细胞的生长情况与对sorafenib的敏感性；蛋白印迹法（Western blot）检测STAT3、p-STAT3（Y705）、p-STAT3（S727）以及其下游蛋白的表达变化。 结果：成功构建了STAT3敲减的细胞株SK-Hep1-shSTAT3。该细胞中STAT3蛋白表达降低，细胞增殖明显受到抑制。Sorafenib处理下调了STAT3磷酸化水平及其下游蛋白Mcl-1和CyclinD1的表达。STAT3基因敲减的SK-Hep1细胞中，sorafenib敏感性增强。 结论：基于shRNA的STAT3基因沉默能明显抑制SK-Hep1细胞增殖，提高细胞对sorafenib的敏感性，有望成为提高sorafenib抗肝癌疗效的一种新手段。
分类： 生物学 >> 植物学 提交时间： 2017-11-13
摘要： 为筛选更优良的实验用牵牛品种，本文研究了黑白二丑的发芽率和早期生长发育过程。在离体条件下和温室中培育观测了黑白二丑的种子萌发和早期苗长数据，结果发现在供试的A19、G12和G14三个品种中，以G12的发芽率为最高，A19其次，G14的发芽率最低；G12的早期生长势也略优于其他两个品种。通过本研究发现G12可以在实验室条件下快速完成世代更替，是后续研究世代间平均突变率的较好材料。
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