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1. chinaXiv:201802.00673 [pdf]

JNK通路对M2巨噬细胞极化及其肿瘤效应的影响

郝瑾; 朱子鑫; 吕小岩; 周钦
分类: 生物学 >> 生物工程

该研究探究了JNK通路对M2巨噬细胞极化及M2介导的促肿瘤效应的影响。构建单核细胞THP1来源M2 巨噬细胞模型(THP1-M2) ,将细胞分为4 组: 用PMA 诱导的未活化巨噬细胞组( M0) ,用PMA,IL-4处理及阴性干扰(DMSO)的M2型巨噬细胞组( M2),用特异性抑制剂阻断JNK通路的M2 型巨噬细胞组( M2-JNK I)。实时荧光定量PCR检测M2 表型marker基因的表达;免疫蛋白印迹法检测M2 表型marker蛋白水平;细胞划痕试验检测巨噬细胞迁移能力;流式细胞数检测786O及OSRC2凋亡。结果与THP1-M2组相比,阻断JNK通路的M2组M2表型marker表达明显下降,同时其细胞迁移能力也呈下降趋势。且阻断JNK通路后,M2巨噬细胞抑制肾癌细胞凋亡的能力减弱。该研究结果表明,抑制JNK通路后,M2巨噬细胞极化状态受损,其促肿瘤效应可转变为抗肿瘤效应。

提交时间: 2018-02-11 来自合作期刊:《中国生物工程杂志》 点击量2495下载量862 评论 0

2. chinaXiv:201802.00672 [pdf]

中间锦鸡儿CiNAC1基因促进转基因拟南芥叶片的衰老

岳文冉; 岳俊燕; 张秀娟; 杨杞; 韩晓东; 王瑞刚; 李国婧
分类: 生物学 >> 生物工程

NAC转录因子家族是植物特有的、最大的转录因子家族之一,参与植物生物胁迫和非生物胁迫应答、激素信号转导、植物次生生长、细胞分裂和植物衰老等多种过程,在植物生长发育过程中起着重要的作用。本实验以中间锦鸡儿CiNAC1基因的过表达拟南芥纯合体株系为材料,以野生型为对照,对CiNAC1基因功能进行分析。结果发现,乙烯处理后,CiNAC1基因过表达株系与野生型拟南芥相比,叶片衰老提前、叶绿素含量降低、离子渗透率升高。实时荧光定量PCR检测发现,乙烯处理后CiNAC1基因过表达株系中与叶绿素降解相关的基因SGR1、SGR2、PPH,以及与衰老相关的基因SAG13、SAG29、ORE1、SINA1 、VNI2和乙烯信号途径中的重要转录因子EIN3的表达量均明显高于野生型拟南芥。表明CiNAC1基因在乙烯诱导的叶片衰老过程中发挥重要作用。

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3. chinaXiv:201802.00671 [pdf]

抗树鼩CD3ε单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

徐婧雯; 张雪梅; 吴忠香; 朱文兵; 蒋曦; 巩蔚; 严丽蔚; 宋杰; 李慧; 董少忠
分类: 生物学 >> 生物工程

目的 制备鼠抗树鼩CD3ε单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法 以GST-CD3ε蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术融合免疫后的BALB/c小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤SP2/0细胞,通过间接ELISA方法检测,筛选出多株能分泌抗树鼩CD3ε的杂交瘤细胞株,经过3次亚克隆筛选后,制备小鼠腹水单克隆抗体,并纯化得到鼠抗树鼩CD3ε单克隆抗体,通过腹水单克隆抗体效价测定、单克隆抗体亲和力测定、单克隆抗体抗原表位分析、 Western blot和FACS分析其生物学特性。结果 筛选到5株能稳定分泌抗树鼩CD3ε单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为78I、87I、92D1、75II和35C8,腹水单克隆抗体效价分别为1:106、1:106、1:104、1:106、1:103,亲和力解离常数(Kd)分别为1.8×10-5、2.9×10-5、4.9×10-5、7.3×10-5、3.6×10-5。5株单克隆抗体抗原表位分析显示78I、87I和75II识别同一抗原表位,而92D1和35C8识别另一抗原表位。经Western blot检测,HRP标记后的92D1能识别GST-CD3ε蛋白和树鼩PBMC,并对大鼠、小鼠和猴的PBMC有抗体交叉反应。经FACS检测,PE-Cy5.5标记后的92D1能特异性识别树鼩PBMC。结论 成功制备出鼠抗树鼩CD3ε的单克隆抗体,为进一步应用于树鼩免疫检测奠定基础。

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4. chinaXiv:201802.00670 [pdf]

负载NGF的可注射壳聚糖透明质酸水凝胶材料理化性能及生物相容性研究

段思腾; 李光然; 马义勇; 邱裕佳; 李宇; 王伟
分类: 生物学 >> 生物工程

目的:制备负载NGF的可注射壳聚糖透明质酸复合水凝胶,探讨其理化性能以及生物相容性。方法:首先京尼平交联制备壳聚糖透明质酸复合水凝胶材料,采用倒置法检测凝胶时间;扫描电镜观察材料形态结构;NGF释放实验、体外溶胀以及降解实验等检测凝胶材料的物理化学性能;通过MTT实验、NGF活性检测、材料与细胞共培养检测凝胶材料生物学性能。结果:在37℃条件下,可注射凝胶材料凝胶时间在37min左右,凝胶材料为多孔网络状结构,凝胶材料8周最多能够降解76%,缓释21天的NGF具有生物活性,凝胶材料能促进RSC96细胞的粘附、增殖、迁移以及细胞活性物质的释放。结论:京尼平交联的壳聚糖透明质酸水凝胶具有良好的生物相容性,能作为NGF的载体材料,具有成为神经导管内填充材料的潜能。

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5. chinaXiv:201802.00669 [pdf]

单克隆抗体Mab-A生产细胞Sp2/0缩小模型培养优化研究

汪国强; 刘建平; 周航
分类: 生物学 >> 生物工程

Sp2/0是一种生产单克隆抗体的常用细胞株。本研究首先在批次培养模式中对适合Sp2/0细胞生长的5种基础培养基、摇床转速、培养温度、二氧化碳浓度、微量元素和GlutaMAXTM替换谷氨酰胺等影响因素进行了筛选研究。结果显示Sp2/0细胞在批次培养中细胞密度最高值达到13.12x106 cells/mL,培养时间为7天。除培养温度会导致不同的细胞生长密度和活率、进而影响培养时间外,其它因素不能导致明显的细胞生长差异。随后在流加培养模式下就14种补料组合进行了筛选,Sp2/0在流加培养模式下细胞的峰值密度可达20-30x106 cells/mL,培养时间9天,单克隆抗体Mab-A日产量最高达到27.20 mg/L。最后应用批次-反复流加培养模式培养Sp2/0细胞,该条件下峰值细胞数为50.42x106 cells/mL,培养时间14天,每天单抗产量(141.10 mg/L)是流加培养的5.19倍。这些研究结果为Sp2/0细胞规模化生产单克隆抗体奠定了一定基础。

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6. chinaXiv:201802.00668 [pdf]

FoxO1在胰岛β细胞代谢灵活性受损及失代偿进程中的作用

冯琳晶; 于洋; 杜红伟
分类: 生物学 >> 生物工程

众所周知,葡萄糖及脂肪酸是胰岛β细胞的关键代谢底物,葡萄糖刺激胰岛β细胞分泌胰岛素是维持机体血糖稳态平衡的关键。胰岛素抵抗发生时,β细胞对能量代谢底物的选择失调,加速胰岛β细胞由代偿到胰岛β细胞失代偿的进程,是肥胖胰岛素抵抗最终发展为2型糖尿病的始动因素。核转录因子FoxO1属于Fox家族成员,在胰腺内广泛表达,在β细胞的代谢,发育,增殖过程中发挥着重要的调节作用。鉴于FoxO1在维持胰岛β细胞功能中的关键作用,现着重对FoxO1在胰岛β细胞代谢灵活性受损及失代偿过程发生中的作用调节进行阐述。为其作为调控胰岛β细胞功能的关键靶点提供参考。

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