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1. chinaXiv:201806.00134 [pdf]

鄱阳湖苦草及马来眼子菜PSⅡ荧光参数对水深变化的光响应

高桂青; 吕顺华; 吕念泽; 卢龙; 李威; 计勇; 游济康; 万鹏
分类: 生物学 >> 植物学

:以鄱阳湖湿地典型沉水植物苦草和马来眼子菜为供试材料, 通过吊桶实验控制水位,利用水下饱和脉冲调制叶绿素荧光仪(Diving-pam)研究不同水深(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 m)对两种植物叶片最小荧光Fo、最大荧光Fm、 PSⅡ最大光化光效率Fv/Fm、有效量子产量Y(Ⅱ)、光化学淬灭系数qP、非光化学淬灭系数qN、非调节性能量耗散的量子产量Y(NO)等荧光参数的影响,探讨各个参数随水深的变化规律。研究结果表明:水深1.5-2.0 m处苦草生物量最大,1.0-1.5 m处马来眼子菜生物量最大;两种植物的Fo均先降低后升高,而荧光参数(FmFv/FmFv/FoY(Ⅱ)qP)均呈现先升高后降低趋势;2.0 m处苦草的Fv/Fm、Fv/Fo达到最大,1.5 m处马来眼子菜达到最大;相同水深下,马来眼子菜的qN比苦草低,与qP变化趋势相反;苦草的Y(Ⅱ)最大值出现在水深1.5-2.0 m范围内,马来眼子菜的Y(Ⅱ)最大值出现在1.5 m处;两者Y(NO)随水深变化均表现出显著差异,过高或过低水深均抑制植物生长;相对光合电子传递速率ETR在不同的水深处理间均差异显著,苦草的最大ETR比马来眼子菜小,说明其有较强的耐弱光能力。综上所述,可通过测定植物叶片荧光特性来反映水深变化,为湖泊水位调控提供参考。在试验条件下,水深1.5-2.0 m苦草光合能力最强,最适宜生长;水深1.0-1.5 m最适宜马来眼子生长。

 

 

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2. chinaXiv:201806.00135 [pdf]

芦苇腐解土中酚酸类化感物质的水分响应特性研究

孙盈; 李萍萍2; 付为国
分类: 生物学 >> 植物学

芦苇和虉草均具有较强的去污能力,常作为湿地植物配置于同一人工湿地进行污水处理。芦苇作为一种强化感植物对虉草具有较强的化感作用,在自然湿地和人工湿地中均会出现芦苇代替虉草的现象,且这一现象的发生与土壤含水量存在一定联系,此外,有研究表明芦苇腐解土对虉草的化感抑制效应与腐解土中总酚酸的量密切相关。因此,该文采用高效液相色谱法对不同水分环境下芦苇腐解土中酚酸类物质进行分离和鉴定,研究芦苇腐解土中主要酚酸类物质的水分响应特性,筛选出其中对水分响应较为明显的酚酸物质种类,通过湿地土壤水分调控,以达成虉草芦苇间的竞争平衡,从而维持人工湿地中两物种的长期稳定共存。结果显示:芦苇腐解土中可分离出没食子酸、香豆酸、香草酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、水杨酸和苯甲酸等8 种酚酸类物质,其中,香豆酸、苯甲酸和阿魏酸等3种酚酸类物质含量较高。分离出的8种酚酸类物质的含量与腐解土的相对含水量均呈显著线性负相关关系,即随着腐解土相对含水量的上升,酚酸类物质的含量均呈现下降趋势,且各种酚酸类物质对水分的响应趋势均可用线性方程较好地拟合。其中,香豆酸、没食子酸和阿魏酸对芦苇腐解土的水分响应最为明显。因此,可将香豆酸、没食子酸和阿魏酸作为主要调控目标,通过调控湿地土壤中水分含量,削弱芦苇对虉草的化感抑制效应,从而维持虉草芦苇群落的稳定。

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3. chinaXiv:201806.00231 [pdf]

应用LNA-PCR法检测乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药位点基因突变

张晓勇; 罗前程
分类: 生物学 >> 生物工程

目的 建立简便、快速、灵敏的锁核酸(Locked nucleic acid,LNA)探针实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测方法,检测乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus ,HBV) 阿德福韦酯(Adefovir dipivoxil,ADV)耐药相关位点(rtA181V、rtN236T)突变。方法 通过基因测序筛选阳性样本,进而构建ADV rt181和rt236位点野生株和突变株重组质粒,设计包含扩增阿德福韦酯rtA181V和rtN236T耐药位点在内的特异性引物和LNA荧光探针,以构建的重组质粒为标准品建立实时荧光PCR反应体系,并通过与基因测序平行检测血清样本以判断检测方法的可行性与准确性。结果 本实验所建立的LNA-PCR法能够检测102 copies/mL的HBV中ADV基因突变,同时具备较高的特异性。通过对89例ADV治疗一年后HBV阳性临床样本进行检测,有8例(8.98%)rtA181V突变,5例(5.61%)rtN236T突变,2例(2.24%)rtA181V和rtN236T混合突变,检测结果与测序结果一致。结论:本实验所建立的LNA-PCR法是一种简便、快速、灵敏的基因突变检测方法,能有效的区分单碱基突变,对慢性乙型肝炎患者德福韦治疗过程中耐药突变的监控和抗病毒药物的调整具有指导意义。

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4. chinaXiv:201806.00232 [pdf]

谷氨酸脱氢酶缺失对单核细胞增生李斯特菌生物被膜、毒力以及胞外蛋白表达的影响

王文静; 杨丽玉; 刘婵娟; 赵进; 罗勤
分类: 生物学 >> 生物工程

【目的】探究谷氨酸脱氢酶缺失对单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, Lm)生物被膜、毒力以及胞外蛋白表达的影响。【方法】利用微孔板法,检测谷氨酸脱氢酶缺失对Lm生物被膜形成能力的影响;比较野生株、谷氨酸脱氢酶缺失株EGDe∆gdhA以及回复菌株EGDe∆gdhA+pERL3-gdhA的溶血活性以及对棉铃虫幼虫的半数致死量,检测谷氨酸脱氢酶缺失对Lm毒力的影响;利用iTRAQ技术对Lm野生株EGDe与谷氨酸脱氢酶缺失株EGDe∆gdhA的胞外蛋白进行分离与鉴定,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。【结果】与野生株相比,缺失株形成的生物被膜量显著降低(P≤0.01),溶血活性下降,对棉铃虫幼虫的半数致死量上升了1.6倍;蛋白质组学结果显示,缺失谷氨酸脱氢酶后差异性表达的胞外蛋白有62个,其中47个蛋白表达量下调,15个蛋白表达量上调。进一步将这些差异表达蛋白质同COG数据库进行比对以及功能聚类分析,结果显示,这些蛋白质的功能分别属于碳水化合物转运与代谢、核苷酸转运和代谢、能量合成与转运相关、 转录以及细胞膜细胞壁相关蛋白等16个功能类别;其中碳氮代谢以及能量转运相关蛋白数量最多,为24个,占所鉴定出的差异蛋白总量的38.71%。表明谷氨酸脱氢酶是单核细胞增生李斯特菌中碳氮代谢和能量转运中的关键酶。同时,我们发现有3个与细菌粘附以及生物被膜形成相关的蛋白表达量下降。以上结果较好地解释了EGDe∆gdhA在基础培养基中生长缓慢和生物量显著性下降,以及生物被膜形成能力降低的现象。【结论】谷氨酸脱氢酶在单核细胞增生李斯特菌生物被膜、毒力以及胞外蛋白表达方面有重要作用。

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5. chinaXiv:201806.00233 [pdf]

国际转基因标识制度变动趋势分析及对我国的启示

徐琳杰; 刘培磊; 李文龙; 孙卓婧; 宋贵文
分类: 生物学 >> 生物工程

转基因标识和消费者知情权与选择权密切相关,因而成为最受关注的转基因政策之一。从1997年第一个转基因标识制度诞生开始,全球已有70多个国家和地区开展了各具特色的转基因产品标识管理。2015年以来,受转基因产业发展政策、公众接受程度、农产品贸易需求、国家政治立场等多重因素的影响和作用,美国、韩国、俄罗斯、乌克兰和日本等国家相继着手调整转基因标识政策或改变实施细则,呈现出强制标识呼声高、标识范围扩大、标注方式更加明确、阴性标识更规范等特点。通过分析国际转基因标识制度以及变动趋势,提出了我国转基因标识在扩大标识范围、设立标识豁免阈值和规范阴性标识等方面的管理建议。

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6. chinaXiv:201806.00234 [pdf]

趋磁细菌及其生物合成磁纳米颗粒-磁小体的生物医学应用研究进展

王方旭; 陈玉玲; 耿读艳; 陈传芳
分类: 生物学 >> 生物工程

近年来,趋磁细菌及其生物自身合成的磁小体由于良好的生物安全性逐渐被人们所认识,并被用于生物工程和医学应用研究。与人工化学合成磁性纳米颗粒相比,从趋磁细菌中提取的磁小体具有生物膜包被、生物相容性高、粒径均一以及磁性高等优势。趋磁细菌因磁小体在其胞内呈链状排列,具有沿磁场方向泳动的能力,也被应用于各种应用研究。因此,本文综述了趋磁细菌及磁小体特性,并就最近的研究进展重点综述趋磁细菌和磁小体在生物工程和医学应用等领域的最新研究进展。

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7. chinaXiv:201806.00236 [pdf]

过表达亚甲基四氢叶酸脱氢酶对高山被孢霉脂质合成的影响

汪企再; 王鸿超; 陈海琴; 赵建新; 张灏; 陈卫; 陈永泉
分类: 生物学 >> 生物工程

高山被孢霉是一种富含多不饱和脂肪酸的丝状真菌,但其脂质过程中NADPH的来源还没有研究透彻。本文以高山被孢霉(尿嘧啶营养缺陷型)作为出发菌株,研究了亚甲基四氢叶酸脱氢酶(MTHFD1)对高山被孢霉脂质合成的影响。首先构建了过表达载体pBIG2-ura5s-MTHFD1,采用根癌土壤杆菌介导转化真菌的方法,将二元表达载体转化进高山被孢霉CCFM501中,在筛选培养基SC-CS平板上进行筛选,进而得到稳定遗传MTHFD1基因的过表达菌株(MA-MTHFD1);其次提取MA-MTHFD1菌株基因组进行PCR鉴定,并结合qPCR分析结果,表明MTHFD1基因成功在高山被孢霉中实现了过量表达;最后通过对MA-MTHFD1中的脂肪酸含量,NADPH含量及NADPH合成途径中相关基因转录水平进行分析,研究MTHFD1基因过表达对脂质合成的影响。实验结果表明,过表达MTHFD1基因可以提高高山被孢霉脂质合成能力。与原养型高山被孢霉相比,MA-MTHFD1菌株中脂肪酸含量提高了40.13%,NADPH的含量提高了26.45%,而且NADPH合成途径中其他相关基因苹果酸酶(ME)和异柠檬酸脱氢酶(IDH)的转录水平也发生了上调。这一系列研究结果表明在高山被孢霉脂质合成还原力形成中,MTHFD1基因起到了关键作用。本文为解析高山被孢霉中NADPH来源及深入研究脂质合成机理,从而对其胞内脂肪酸代谢通路进行分子水平上的改建提供了一定的理论依据。

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8. chinaXiv:201806.00235 [pdf]

枯草芽孢杆菌壳聚糖酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖及其组分分析

程功; 焦思明; 任立世; 冯翠; 杜昱光
分类: 生物学 >> 生物工程

对来源于枯草芽孢杆菌菌株168(Bacillus subtilis 168)的壳聚糖酶编码基因进行了序列优化及全合成并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中实现了分泌表达,表达产物的蛋白浓度达到0.30 mg/ml。表达的壳聚糖酶最适pH为5.6,最适温度为55 ℃,比酶活达84.54 U/ml。该酶在50 ℃及以下较稳定。利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(Ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-QTOF MS)对产物的组分进行了分离及鉴定。根据一级质谱信息,推测酶解产物中包含至少37种聚合度2-18,不同脱乙酰度的壳寡糖组分。综上,利用毕赤酵母分泌表达了来源于枯草芽孢杆菌菌株168的壳聚糖酶基因,利用表达产物水解制备了低脱乙酰度壳寡糖并对其组分进行了分析,可为后续壳寡糖结构与功能关系的研究提供参考。

提交时间: 2018-06-14 来自合作期刊:《中国生物工程杂志》 点击量2下载量1 评论 0

9. chinaXiv:201806.00021 [pdf]

古林箐秋海棠叶斑结构对叶色的影响

杜文文; 崔光芬; 王继华; 段青; 马璐琳; 贾文杰; 王祥宁
分类: 生物学 >> 植物学

以古林箐秋海棠(Begonia gulinqingensis)为材料,通过分析叶片形态特征、上表皮光学特性、组织结构、叶绿素含量及叶绿素荧光参数Fv/Fm探讨叶片色斑形成原因。结果表明:古林箐秋海棠叶斑发生频率和数量无明显规律,但发生部位相对稳定,叶斑主要发生在正对叶柄的两条主脉之间。斑区有两种光反射模式,点状反射和多角形反射,栅栏组织细胞呈近等轴的圆形,排列疏松,与上表皮细胞间存在空隙;非斑区只有点状反射模式,栅栏组织细胞为漏斗型,排列紧密,与上表皮细胞间不存在空隙。斑区和非斑区叶绿体均有密集的堆积基粒和丰富的类囊体膜,斑区叶绿素a、b及总叶绿素含量仅比非斑区分别低24.9%,25.2%,25.1%;叶绿素荧光参数Fv/Fm值斑区为0.793,非斑区为0.790。虽然斑区叶绿素含量比非斑区略低,但叶绿体结构完整,且叶绿素荧光参数与非斑区无显著差异。斑区上表皮与栅栏组织细胞间的空隙可使光线到达绿色组织时发生二次反射,在叶片表皮细胞边缘形成白色多边形光反射使该区域相对周围正常叶片区域偏白,基于上述结果可推测古林箐秋海棠的淡绿色块斑形成与特殊的叶片结构有关。

提交时间: 2018-06-12 来自合作期刊:《广西植物》 点击量422下载量79 评论 0

10. chinaXiv:201806.00022 [pdf]

无菌猕猴桃种子采集方法研究

孙菁婕; 杨迪; 邹婷婷; 赵新仕; 唐娟; 史佳杰; 张乃群
分类: 生物学 >> 植物学

无菌的猕猴桃种子是猕猴桃胚乳培养、实生苗微嫁接等技术的基础材料,利用消毒剂灭菌是常用的无菌种子采集手段,应用最广泛的消毒剂为升汞(Mercuric chloride)和次氯酸钠(NaClO)。该文提出了一种新的无菌猕猴桃种子采集方法——无菌搅拌法,为了探索其准确性和应用性,该研究比较了0.2 %升汞灭菌20 min、10 %次氯酸钠灭菌20 min、无菌搅拌法3种方式采集无菌猕猴桃种子的效果,及对种子萌发和幼苗形成的影响。结果表明:无菌搅拌法、0.2 %升汞灭菌20 min是稳定有效的无菌猕猴桃采集方式,10 %次氯酸钠灭菌20 min的采集效果不稳定;在相同的时间内,无菌搅拌法的种子发芽率最高,为89.90 %,但发芽势较低,均可正常成苗;10 %次氯酸钠灭菌20 min的发芽率次之,与无菌搅拌法的种子无显著差异,发芽势和成苗率最高,分别为47.47 %和67.86 %,且有打破猕猴桃种子休眠的作用,整体作用类似于赤霉素(GA3)浸种的效果;0.2 %升汞灭菌20 min对猕猴桃种子的萌发有抑制作用,各项指标均显著低于无菌搅拌法种子,且生长缓慢。此外,无菌搅拌法是物理处理,对种子、操作人员、环境均无害。该研究证实了无菌搅拌法的实用性和优势,发现了次氯酸钠在打破猕猴桃种子休眠方面的作用,为其它同类型果实的无菌种子采集提供了参考。

提交时间: 2018-06-12 来自合作期刊:《广西植物》 点击量464下载量50 评论 0

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