分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-09-20
摘要： 巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）是近年来发展迅速的一种高效表达的宿主菌。毕赤酵母属甲醇营养型酵母，具有操作简便、易于高密度培养、生长迅速、对翻译后的蛋白进行加工、生产成本低等优点。毕赤酵母表达系统已有20多年的研究开发使用历史，有多种表达载体和改良的宿主菌可供选择，可进行胞内表达或分泌表达。利用基于同源重组的DNA转化系统将基因整合进基因组是目前最重要的基因编辑手段之一，已经被广泛应用于毕赤酵母中；但毕赤酵母面临着筛选标记不足的难题。 在Cre/loxP系统中，当两个loxP位点以顺时针相同的方向放在一段序列之间时，Cre酶能识别并切除该序列，留下一个loxP位点。当使用突变的loxP序列（例如lox71和lox66），当被Cre重组酶识别并进行作用后，会留下一个新的突变的lox72位点，并不会与下次引入的loxP位点进行作用，从而避免了残留的loxP位点与新引入的loxP位点被Cre重组酶识别的可能。 本文通过在毕赤酵母通用质粒pPICZA和pGAPZA的基础上，在博来霉素抗性基因表达盒后融合了诱导表达Cre的表达盒，并在这两个表达盒前后引入了lox71和lox66位点，分别构建了质粒pZACH和pGACH；进而进行筛选标记循坏利用。具体过程如下：1、质粒转化毕赤酵母，使用博来霉素进行抗性筛选得到阳性转化子；2、将阳性转化子接种于含有诱导剂甲醇的YPM培养基中，培养过夜；3、将培养过夜的含菌体的培养基划线于不含抗生素的YPD平板上，培养至酵母单菌落可见；4、将3中的酵母单菌落同时点种于不含抗生素的YPD平板和含博来霉素的YPDZ平板上，如能在YPD平板上生长而不能在YPDZ平板上生长，则说明该菌落的博来霉素抗性表达盒已丢失，再使用PCR鉴定进行验证。整个抗性素标记丢失需要约4-5天。 使用质粒pZACH分别在毕赤酵母中表达了来源于柠檬酸杆菌（Citrobacteramalonaticus）CGMCC 1696的植酸酶和来源于抗辐射不动杆菌（Acinetobacterradioresistens） CMC-1的脂肪酶，这些质粒的抗性素标记丢失效率均大于70%，而且植酸酶和脂肪酶的产量与菌体生长都和使用基础质粒pPICZA进行表达的结果相似。该质粒对外源蛋白表达以及菌体生长并无不良影响。 使用筛选标记循坏利用质粒pZACH和pGACH，可以克服毕赤酵母中筛选标记不足的缺点，便于更好地在毕赤酵母中进行基因改造，从而为毕赤酵母的进一步工业应用提供基础。
分类： 天文学 >> 天文学 提交时间： 2019-03-25 合作期刊: 《天文研究与技术》
摘要： 卫星采集的数据是按位或者字节的形式存储，这些格式都是地面预定义的。卫星下传的数 据经过去格式及分包后，地面需要根据这些预定义格式将数据进行解析，生成可读的十进制数。这些格式尽管在不同卫星及载荷上有很大差异，但是它们都具有可解析性。本文 设计了一种软硬件接口来定义及存储这些解析格式，同时根据这些格式产生软件可读的配置文件从而进行数据解析。这对大量数据文件来讲省时省力，同时可以保障解析的正确性。
分类： 天文学 >> 天文学 提交时间： 2018-07-13 合作期刊: 《天文研究与技术》
摘要： 天文卫星获取的数据需要经过天文卫星下传数据处理系统的一系列加工生成可以分析的数据产品，这些产品及相应软件要发布给国内外用户。同时数据处理系统还要监测载荷状态，数据质量及天体源爆发情况等。这样，下传数据处理系统的建设直接关系到物理成果的获取，规划该系统就变得非常有意义。本文从数据产品定义，子系统规划，数据流程等方面介绍该系统的规划，并提出以模块化开发方式从整体上协调各个子系统的开发，使各个系统及其软件相互配合，共同促进科学产出。
分类： 农、林、牧、渔 >> 农业基础学科 提交时间： 2017-11-06 合作期刊: 《中国生态农业学报》
摘要： 为评价农业经营方式转变带来的生态环境效应, 本研究选取重庆市荣昌县农地流转典型区域, 结合实地调查和能值分析方法, 分别以普通农户和经营大户的投入和产出表征农地流转前后的农业生态系统投入和产出, 对研究区农地流转前后农业生态系统能值变化进行了对比分析。结果表明, 农地流转后研究区农业生态系统的购买能值投入较流转前减少70.48%, 能值产出增加2.15%。这使得农业生态系统的净值产出率由农地流转前的0.01 增加到流转后的0.04, 提高了300%。农业机械对人工的替代是单位投入减少的最主要因素,从而使得农业生产效率得到大幅度提升。对于可更新系数小于系统可更新系数的单项投入来讲, 减少其投入量能够使系统的环境负载率降低; 对于可更新系数大于系统可更新系数的单项投入来讲, 增加其投入量能够 使系统的环境负载率降低。但是研究区农业生态系统单项投入的变化均使得环境压力有所增大。其中, 人力投入大幅度减少, 电力柴油等投入有不同程度地增加。因此, 研究区农业生态系统的环境负载率由农地流转前的0.12 增加到流转后的0.65, 提高441.67%; 可持续性指标由流转前的0.08 降低到流转后的0.06, 生态可持续性降低25.00%。研究发现, 适度规模经营能够有效降低生产成本, 增强产品的市场竞争力; 不过, 种植结构调整高附加值化和高产量追求, 导致农药化肥等购买资源大幅度地增加, 加剧了农业生态系统潜在的生态环境风险。研究认为, 农业生态系统可持续发展的关键在于对农业集约化发展方式的选择。为此, 国家在引导农地流转和发展适度规模经营的政策体系中需对此给予指导并施以规范。
分类： 天文学 >> 天文学 提交时间： 2021-11-12 合作期刊: 《天文研究与技术》
摘要： 硬X射线调制望远镜卫星（Hard X-ray Modulation Telescope，HXMT）是一颗空间X射线观测卫星，目前已经获取了大量观测数据。作为载荷硬件和科学分析的桥梁，数据分析软件起到非常重要的作用，它与科学结果的产出息息相关。本文主要介绍HXMT数据分析软件开发的需求，分析过程及软件框架等。HXMT数据软件不仅提供了一系列工具帮助用户分析HXMT数据，同时用户可以基于HXMT框架开发自己的程序进而分析HXMT数据，更为重要的是本软件提供的底层库可以在不同卫星系统中使用。希望本工作对未来数据分析软件的设计和开发提供借鉴。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-25 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验通过对鸭肥肝和鹅肥肝的基本营养成分、氨基酸、脂肪酸进行分析和营养评价，旨在比较鸭肥肝和鹅肥肝氨基酸、脂肪酸营养价值及质构特性的差异性。分别选择填饲期为28 d的鹅肥肝和填饲期为14 d的鸭肥肝，采用氨基酸分析仪、气相色谱仪等仪器进行测定分析，比较二者营养价值的差异性。结果表明：1）鸭肥肝中水分、粗脂肪含量极显著低于鹅肥肝（P<0.01），而粗灰分、粗蛋白质含量极显著高于鹅肥肝（P<0.01）。2）鸭肥肝和鹅肥肝的氨基酸种类相同，均未检测到色氨酸，其余氨基酸（除半胱氨酸和脯氨酸）含量均有显著或极显著差异（P<0.05或P<0.01）。鸭肥肝的必需氨基酸指数（EAAI）为64.34，鹅肥肝的EAAI为60.25；鸭肥肝的氨基酸比值系数评分（SRC）为73.34，鹅肥肝的SRC为47.11；鹅肥肝中呈味氨基酸的比例高于鸭肥肝，鸭肥肝中药用氨基酸含量高于鹅肥肝。3）鹅肥肝中不饱和脂肪酸含量为61.70%，饱和脂肪酸含量为39.31%；鸭肥肝中不饱和脂肪酸含量为59.11%，饱和脂肪酸含量为41.25%。鹅肥肝中饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸的比例为5.53:7.69:1.00，鹅肥肝脂肪酸的营养价值优于鸭肥肝。4）鸭肥肝中的铬、铜、铁、磷、含量极显著高于鹅肥肝（P<0.01），鹅肥肝中钙含量极显著高于鸭肥肝（P<0.01）。5）鸭肥肝的硬度极显著高于鹅肥肝（P<0.01），鸭肥肝的黏附性极显著低于鹅肥肝（P<0.01）。由此可见，鸭肥肝氨基酸营养价值高于鹅肥肝，鹅肥肝脂肪酸营养价值高于鸭肥肝；鹅肥肝嫩度好，鸭肥肝硬度高。
点击量
点击量
下载量
评论
