抗埃博拉病毒核蛋白抗体的制备与双抗夹心ELISA检测方法的建立

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

刘俊伟 常瑞恒 回鹏 董士尚 王金凤 孙波 杨诚

摘要： 目的 制备抗埃博拉病毒核蛋白（EBOV NP）单克隆抗体和多克隆抗体，建立针对EBOV NP的ELISA检测方法。方法 以重组EBOV NP免疫动物并制备多克隆抗体和单克隆抗体。在此基础上，通过优化抗体浓度、包被液等条件建立检测EBOV NP的双抗夹心ELISA方法。结果 制备出了兔多克隆抗体，筛选出2株可分泌单克隆抗体的鼠源杂交瘤细胞株。Western Blot实验结果表明兔多抗与鼠单抗的结合区域均为N端1~35氨基酸。通过优化，建立了针对EBOV NP的双抗夹心ELISA检测方法。其线性范围是31.2 -1000 ng/mL，最低检测限为2.6 ng/mL。结论 制备出了抗EBOV核蛋白的高特异性多克隆抗体和单克隆抗体，建立了定量检测EBOV核蛋白的方法。

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