分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-21 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 观察pannexin1通道在顺铂诱导睾丸癌I-10细胞凋亡中的作用及其机制。方法 MTT法检测细胞存活率；Annexin V/PI双染法和Hoechst 33258染色法分别检测细胞早期和晚期凋亡；化学发光法检测细胞外ATP浓度；ELISA法检测细胞内IP 3 含量。结果 MTT法显示pannexin1通道抑制剂CBX与顺铂合用组的细胞存活率高于单用顺铂组（P<0.01）；Annexin V/PI双染法显示CBX与顺铂合用组的细胞早期凋亡率低于单用顺铂组（P<0.001）；Hoechst 33258染色法显示CBX与顺铂合用组的细胞晚期凋亡率低于单用顺铂组（P<0.01）；化学发光法表明CBX与顺铂合用组的细胞外ATP浓度低于单用顺铂组（P<0.05）；ELISA法表明CBX与顺铂合用组的细胞内IP 3 浓度低于单用顺铂组（P<0.05）。结论 Pannexin1通道参与顺铂诱导睾丸癌I-10细胞的凋亡，其机制可能与介导ATP/IP 3 信号通路有关。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 浓度递增法与大剂量冲击法分别诱导两种小鼠睾丸癌I-10顺铂耐药细胞株，比较两种细胞株之间形态差异，并检测耐药相关蛋白MDR1及P-gp的表达水平。方法 采用浓度递增法诱导耐药细胞株I-10/DDPi，大剂量冲击法的诱导耐药细胞株I-10/DDPh；显微镜下观察细胞形态改变；MTT法分别检测耐药指数，绘制生长曲线；Western blot检测耐药相关蛋白MDR1及P-gp的表达；Transwell法检测细胞侵袭能力的变化。结果 正常睾丸癌I-10细胞及两种方法建立的相应耐药株均为贴壁生长，形态饱满，大体呈梭形，上皮样，细胞大小大致相同；I-10/DDP细胞大小不同，形态不规则，细胞表面有细长微绒毛类似触角，分散排列。耐药株I-10/DDPi及I-10/DDPh 对顺铂的耐药指数分别为3.924和3.099，耐药细胞系的倍增时间较正常 I-10 细胞延长。耐药细胞中耐药相关蛋白MDR1及P-gp表达显著高于正常 I-10 细胞，其中I-10/DDPi增加更为明显。耐药细胞株侵袭力增强，其中I-10/DDPh增加更为明显。 结论 采用两种方法均可成功建立的耐顺铂睾丸癌细胞株，且大剂量冲击法建立的耐顺铂细胞株I-10/DDPh更接近于临床中的肿瘤耐药细胞。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 探讨丙泊酚对脑缺血再灌注损伤的保护作用与缝隙连接的关系及其可能机制。方法 70只雄性SD大鼠随机分为假手术（sham）组、缺血再灌注（I/R）组、丙泊酚低剂量（P 25 ，25 mg/kg）组、中剂量（P 50 ，50 mg/kg）组、高剂量（P 100 , 100 mg/kg）组、甘珀酸（CBX）干预缺血再灌注（I/R+CBX）组和甘珀酸干预丙泊酚高剂量（P 100 +CBX）组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，脑缺血2 h，再灌注24 h；采用 Longa's法对大鼠进行神经行为学评分；TTC染色法检测脑梗死体积的变化；Western blot法检测缝隙连接蛋白43（Cx43）、蛋白激酶C（PKC）以及凋亡相关因子Bax、Bcl-2的蛋白表达变化。结果 与缺血再灌注组相比，除丙泊酚低剂量组外，丙泊酚中、高剂量组神经功能缺损评分和脑梗死体积百分率均明显降低，且高剂量组效果更佳；甘珀酸可以进一步增强丙泊酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。Western blot 结果显示，与sham组相比，I/R组Cx43蛋白表达以及Bax与Bcl-2比值显著增高，而PKC蛋白表达明显降低；丙泊酚高剂量组较I/R组Cx43蛋白表达及Bax与Bcl-2比值明显降低，PKC蛋白表达显著增多；且甘珀酸可以使丙泊酚的这一作用增强。结论 丙泊酚预处理可减轻I/R损伤，其机制可能与通过PKC信号通路抑制缝隙连接功能及降低Bax/Bcl-2的比值有关。
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