人SP-B蛋白转基因小鼠及细菌性肺炎模型的构建

摘要: 目的：构建携带人SP-B蛋白+1580 SNP不同等位基因的转基因小鼠并进行细菌性肺炎模型的造模。方法：利用受精卵原核注射技术将hSP-B基因整合至小鼠染色体上获得F0代小鼠，将其与mSP-B基因敲除鼠进行交配，逐步去除转基因小鼠体内mSP-B基因。利用PCR技术鉴定小鼠基因型，通过测序确定+1580位点的等位基因。将铜绿假单胞菌经支气管灌注接种至小鼠肺内进行细菌性肺炎造模，对照组注射等量灭菌生理盐水。结果：F2代小鼠只表达人SP-B蛋白而不表达鼠SP-B蛋白，蛋白表达量与人肺内含量相近，即为构建成功的转基因小鼠。3个小鼠家系+1580位点等位基因为T，1个家系为C。细菌接种后24小时，小鼠肺泡内炎症渗出明显，大量中性粒细胞浸润，SP-B蛋白含量明显降低，但不同等位基因间无明显差异。结果：成功构建只表达人SP-B蛋白的转基因小鼠模型，细菌性肺炎模型造模成功，为今后进一步研究人SP-B蛋白的生理功能及+1580基因多态性与肺疾病的关系提供了有力的工具。