分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-21 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 观察pannexin1通道在顺铂诱导睾丸癌I-10细胞凋亡中的作用及其机制。方法 MTT法检测细胞存活率；Annexin V/PI双染法和Hoechst 33258染色法分别检测细胞早期和晚期凋亡；化学发光法检测细胞外ATP浓度；ELISA法检测细胞内IP 3 含量。结果 MTT法显示pannexin1通道抑制剂CBX与顺铂合用组的细胞存活率高于单用顺铂组（P<0.01）；Annexin V/PI双染法显示CBX与顺铂合用组的细胞早期凋亡率低于单用顺铂组（P<0.001）；Hoechst 33258染色法显示CBX与顺铂合用组的细胞晚期凋亡率低于单用顺铂组（P<0.01）；化学发光法表明CBX与顺铂合用组的细胞外ATP浓度低于单用顺铂组（P<0.05）；ELISA法表明CBX与顺铂合用组的细胞内IP 3 浓度低于单用顺铂组（P<0.05）。结论 Pannexin1通道参与顺铂诱导睾丸癌I-10细胞的凋亡，其机制可能与介导ATP/IP 3 信号通路有关。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 浓度递增法与大剂量冲击法分别诱导两种小鼠睾丸癌I-10顺铂耐药细胞株，比较两种细胞株之间形态差异，并检测耐药相关蛋白MDR1及P-gp的表达水平。方法 采用浓度递增法诱导耐药细胞株I-10/DDPi，大剂量冲击法的诱导耐药细胞株I-10/DDPh；显微镜下观察细胞形态改变；MTT法分别检测耐药指数，绘制生长曲线；Western blot检测耐药相关蛋白MDR1及P-gp的表达；Transwell法检测细胞侵袭能力的变化。结果 正常睾丸癌I-10细胞及两种方法建立的相应耐药株均为贴壁生长，形态饱满，大体呈梭形，上皮样，细胞大小大致相同；I-10/DDP细胞大小不同，形态不规则，细胞表面有细长微绒毛类似触角，分散排列。耐药株I-10/DDPi及I-10/DDPh 对顺铂的耐药指数分别为3.924和3.099，耐药细胞系的倍增时间较正常 I-10 细胞延长。耐药细胞中耐药相关蛋白MDR1及P-gp表达显著高于正常 I-10 细胞，其中I-10/DDPi增加更为明显。耐药细胞株侵袭力增强，其中I-10/DDPh增加更为明显。 结论 采用两种方法均可成功建立的耐顺铂睾丸癌细胞株，且大剂量冲击法建立的耐顺铂细胞株I-10/DDPh更接近于临床中的肿瘤耐药细胞。
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