白细胞介素一22促进类风湿关节炎成纤维化膜细胞的增殖

摘要: 目的 通过白细胞介素-22（IL-22）干预类风湿关节炎（RA）成纤维滑膜细胞（FLS）以期明确IL-22促进其增殖的机制。 方法 无菌条件下获取的RA滑膜组织，应用组织块分离法培养RA-FLS， 含10% FBS的DMEM培养基进行细胞传代培养，并对 第4~5代FLS应用vimentin/CD68进行免疫组化法鉴定；不同浓度的IL-22干预FLS培养24、 48、 72 h后，MTT法检测细胞增殖 程度；联合IL-22和/或AG490干预FLS，于冰面上用含蛋白酶抑制剂的细胞裂解液获取细胞总蛋白，再经超声、离心提取、蛋白 定量后，Western blot法检测STAT3、ERK1/2、 P38蛋白及其磷酸化蛋白的表达，统计分析采用SPSS20.0软件进行， P<0.05为差 异有统计学意义。结果 不同浓度IL-22干预FLS的增殖均较对照组呈梯度增高变化，差异具有统计学意义（P<0.05）。随着IL22干预时间的延长，STAT3总蛋白表达相对灰度值的整体水平差异无统计学意义（P=0.68），但是其磷酸化蛋白表达相对灰度值 整体水平差异具有统计学意义（P<0.001），且在干预的不同时间点STAT3磷酸化蛋白相对表达量较基线0 h时均显著升高， 且 差异具有统计学意义（P<0.001）。IL-22干预后的ERK1/2和P38总蛋白及其磷酸化蛋白表达相对灰度值差异均无统计学意 义（P>0.05）。联合50 ng/mL IL-22和100 μmol/LAG490干预FLS不同时间后，细胞的增殖程度较单用IL-22干预均显著降低 （P<0.01）。结论 IL-22以浓度依赖方式促进RA成纤维化膜细胞STAT3蛋白磷酸化所介导的细胞增殖，而非ERK1/2和P38蛋 白所介导的信号通路。