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1. chinaXiv:201812.00293 [pdf]

玉米赤霉烯酮对体外培养鸡脾脏淋巴细胞凋亡的影响

李欣虹; 郑若愚; 辜彦霏; 陶思邑; 任志华; 王亚超; 邓俊良
Subjects: Biology >> Zoology

本试验旨在研究玉米赤霉烯酮(ZEA)对体外培养鸡脾脏淋巴细胞凋亡的影响。ZEA染毒浓度为0(对照)、0.10、0.40、1.60、6.25和25.00 µg/mL,染毒48 h后检测体外培养鸡脾脏淋巴细胞凋亡率、坏死率、细胞线粒体膜电位、细胞内活性氧(ROS)以及B淋巴细胞瘤–2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bak-1、p53及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶–3(caspase-3) mRNA表达量及细胞培养液上清中相应凋亡基因蛋白含量。结果显示,与对照组比较,ZEA染毒导致鸡脾脏淋巴凋亡率、坏死率、ROS含量、细胞培养上清液中p53、Bax、Bak-1及caspase-3的含量以及细胞内p53、Bax、Bak-1及caspase-3的mRNA表达量显著或极显著提高(P<0.01或P<0.05),且随毒素浓度升高而升高;而ZEA组细胞线粒体膜电位和上清液Bcl-2含量却极显著低于对照组(P<0.01)。由此可知,ZEA染毒可促进体外培养鸡脾脏淋巴细胞凋亡,且呈剂量依赖性。

submitted time 2018-12-24 From cooperative journals:《动物营养学报》 Hits110Downloads72 Comment 0

2. chinaXiv:201812.00143 [pdf]

在酿酒酵母中研究人类mOGT基质导向序列的功能

李凤; 高晓冬; 中西秀树
Subjects: Biology >> Bioengineering

人类线粒体N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(mitochondrial O-GlcNAc transferse, mOGT)通过其N端基质导向序列(matrix targeting sequence,MTS)定位于线粒体内膜上,mOGT的过表达将导致细胞的凋亡。蛋白质的O-GlcNAc修饰存在于绝大多数真核生物中,而酿酒酵母唯独缺乏该修饰途径。对人体mOGT过表达引起酿酒酵母生长缺陷的机理进行分析,期望利用该模型研究mOGT导致的细胞凋亡调控机制。在酿酒酵母细胞中表达人体mOGT及其截短序列发现:mOGT对酿酒酵母的生长抑制及细胞中的定位依赖于N端全长的MTS序列;MTS序列在酿酒酵母中共表达导致线粒体融合。MTS序列过表达的酿酒酵母菌可以作为研究mOGT引起细胞凋亡的模式细胞。

submitted time 2018-12-16 From cooperative journals:《中国生物工程杂志》 Hits1037Downloads200 Comment 0

3. chinaXiv:201806.00150 [pdf]

抑制CaMKII减轻线粒体氧化应激可改善离体心脏缺血再灌注损伤

孔令恒; 陈玉龙; 孙娜; 魏明; 朱娟霞; 苏兴利
Subjects: Medicine, Pharmacy >> Preclinical Medicine

目的:探讨钙/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)在离体心脏缺血再灌注(IR)损伤中的作用和可能机制。方法采用大鼠离体心脏缺血再灌注(IR 45 min/120 min)模型,将40只大鼠随机分为对照组(Control)、KN-93药物对照组(2.5 μmol/L KN93)、IR组和CaMKII特异性抑制剂KN-93干预缺血再灌注组(KN-93+IR),以左室心脏功能、冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和心肌肌钙蛋白(cTnI)含量、心肌梗死面积评价心脏损伤程度,Western-blot检测CaMKII磷酸化(p-CaMKII)、CaMKII氧化(ox-CaMKII)和PLN磷酸化(p-PLN)蛋白的表达,试剂盒检测线粒体超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果与Control组相比,KN-93组各项指标均无明显变化;IR组心脏功能、线粒体SOD的活性降低(P<0.01),而心肌梗死面积、冠脉流出液中LDH活性和cTnI 含量、p-CaMKII、ox-CaMKII和p-PLN的表达、线粒体MDA的含量均明显升高(P<0.01);KN-93干预IR组可明显改善心脏功能(P<0.01),增加线粒体SOD活性,减小心肌梗死面积、LDH活性、cTnI含量、p-CaMKII、ox-CaMKII和p-PLN的表达以及线粒体MDA含量(P<0.01)。结论CaMKII参与离体心脏缺血再灌注损伤,抑制CaMKII可通过降低线粒体氧化应激进而减轻离体心脏缺血再灌注损伤。

submitted time 2018-06-15 From cooperative journals:《南方医科大学学报》 Hits309Downloads146 Comment 0

4. chinaXiv:201712.00972 [pdf]

棕榈酸通过肝细胞氧化应激反应激活炎症小体

许雯; 郭予斌; 李旭; 何美蓉; 刘思德
Subjects: Medicine, Pharmacy >> Preclinical Medicine

目的 观察棕榈酸(PA)对肝细胞氧化应激反应及炎症小体产生的影响。方法(1)将正常小鼠肝细胞AML12分别用不同浓度的棕榈酸(0、0.15、0.25、0.4 mmol/L)处理;(2)将AML12细胞分为空白对照组(control组)、棕榈酸组(PA组)及棕榈酸+N-乙酰半胱氨酸组(PA+NAC组)并予以相应药物处理。24 h后检测细胞中脂肪沉积情况、细胞总ROS、线粒体来源ROS、NOX4蛋白表达、NOX4的定位以及炎症小体和IL-1β的表达。结果 与control组相比,PA组细胞质中脂滴增加,细胞总ROS(12463.09±2.72 vs 6691.23±2.45,P=0.00)及线粒体来源ROS含量(64.98±0.94 vs 45.04±0.92,P=0.00)上升,NOX4、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达增加,IL-1β表达增加(1603.52±1.32 vs 2629.33±2.57,P=0.00),且发现线粒体和NOX4在细胞质中存在共定位,而抗氧化剂NAC除了能使PA诱导的ROS产生减少(7782.15±2.87 vs 5445.6±1.17,P=0.00),还可使NLRP3、ASC及caspase-1蛋白表达下降。结论 棕榈酸刺激肝细胞后,可以导致脂滴在肝细胞质中大量沉积,亦可以通过线粒体和NOX4途径导致肝细胞氧化应激反应,并因此促进细胞炎症小体的激活和IL-1β的分泌。

submitted time 2017-12-27 From cooperative journals:《南方医科大学学报》 Hits279Downloads192 Comment 0

5. chinaXiv:201712.00413 [pdf]

关于人工耳蜗植入治疗遗传性耳聋的研究进展

李瑜;纳玉萍;郭敏
Subjects: Medicine, Pharmacy >> Preclinical Medicine

耳聋的致病因素复杂,50%以上由遗传因素所致。遗传性耳聋80%为常染色体隐性遗传模式,其中70%~80%为非综合征性耳聋,15%~24%为常染色体显性遗传模式,其余1%~2%为连锁遗传模式。母系遗传性聋发病多与氨基糖苷类抗生素诱发有关,不当用药会造成敏感个体的重度感音性聋。目前发现大约120个耳聋致病基因,包括数个耳聋重点致病基因:GJB2、SLC26A4及线粒体DNA A1555G突变等。人工耳蜗是一种生物医学工程装置,可以帮助听力障碍人士恢复听力和言语交流能力的。近年来随着科技的不断发展和完善,人工耳蜗植入技术已日趋成熟,其临床应用在我国也得到了逐步开展,并取得了较为显著的疗效。然而,人工耳蜗植入并非适合所有耳聋患者,其适应症还在进一步的总结和探索当中,明确患者的耳聋病因是衡量手术指针的首要因素。本文就应用人工耳蜗植入治疗遗传性耳聋的现状及其未来发展趋势作简要介绍。

submitted time 2017-12-07 From cooperative journals:《分子影像学杂志》 Hits181Downloads131 Comment 0

6. chinaXiv:201712.00791 [pdf]

STOML-2过表达抑制人宫颈鳞癌Siha细胞凋亡

胡国林; 姚广裕; 邓欢; 赵可雷; 许斐斐; 梁卫江; 刘国炳
Subjects: Medicine, Pharmacy >> Preclinical Medicine

目的 研究STOML-2过表达抑制人宫颈鳞癌Siha细胞凋亡的机制,以期为宫颈癌的治疗开辟新的路径。方法 用携带STOML-2基因的腺病毒感染Siha细胞作为过表达组,同时设立空白载体组及空白组作为对照,72 h后用Western blot检测STOML-2的过表达,并用MTT法检测STOML-2过表达对细胞增殖的影响。用IC50 的顺铂处理各组细胞24 h后,利用荧光显微镜观察STOML-2过表达对细胞凋亡的影响,并利用流式细胞仪进一步分析细胞的凋亡率;采用Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白caspase3、cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax以及线粒体内外细胞色素C(Cyt C)表达量的变化。结果 与空白组及空白载体组相比,Western blot结果显示过表达组STOML-2的表达量明显增加;MTT结果显示,STOML-2过表达后可明显促进Siha细胞的增殖。用IC 50 的顺铂处理细胞24 h后,荧光显微镜下,空白载体组凋亡细胞的细胞核大小不一,浓染致密的蓝色荧光显示核固缩,部分核裂解为凋亡小体,而过表达组细胞核多较完整,着色较浅,染色质密度均匀一致,并且流式细胞仪结果同样提示STOML-2过表达后细胞凋亡率明显降低。Western blot结果显示过表达组线粒体凋亡途径相关蛋白cleaved-caspase3、Bax以及线粒体外Cyt C表达水平降低,而caspase3、Bcl-2及线粒体内Cyt C的表达水平则相应升高。结论 STOML-2过表达可以促进Siha细胞增殖,其抑制凋亡的机制可能与线粒体凋亡途径相关。

submitted time 2017-12-07 From cooperative journals:《南方医科大学学报》 Hits193Downloads133 Comment 0

7. chinaXiv:201712.00876 [pdf]

肠道病毒71型对Vero细胞线粒体的损伤作用及机制

林佩欣(1);申 洪(1);高璐璐(1);黄业恩(1);张耀忠(1);陈 清(2)
Subjects: Medicine, Pharmacy >> Preclinical Medicine

目的探讨肠道病毒71 (EV71)对Vero细胞的损伤作用及机制,为分析EV71的致病机制提供新思路。方法将临床分离的一株EV71接种于Vero细胞,观察细胞的形态改变,用免疫荧光方法检测EV71抗原在Vero细胞中的表达,用透射电镜观察Vero细胞超微结构的改变,用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测试分析病毒颗粒直径和面积密度以及空泡化线粒体的比例和面积密度。结果EV71感染后Vero细胞形态发生改变,由梭形变为圆形或死亡,免疫荧光检测显示EV71抗原定位于胞质,超微结构观察可见胞质中有大量呈团块状分布、晶格状排列的高电子密度病毒颗粒,颗粒平均直径为16.3 nm,平均面积密度为38.3%;线粒体肿胀、变性并空泡化、崩解,空泡化线粒体数量约占90.9%,平均面积密度为89.2%;部分线粒体内可见EV71病毒颗粒。结论EV71感染Vero 细胞后在其胞质中增殖,并可侵入线粒体,导致线粒体直接损伤并致细胞死亡;线粒体是EV71在Vero细胞内的作用靶标。

submitted time 2017-12-07 From cooperative journals:《南方医科大学学报》 Hits218Downloads151 Comment 0

8. chinaXiv:201712.01192 [pdf]

线粒体雌激素受体β通过与Bad相互作用抑制非小细胞肺癌细胞的凋亡

谢强;黄作平;刘颖;刘晓;黄磊
Subjects: Medicine, Pharmacy >> Preclinical Medicine

目的探究线粒体雌激素受体β(ERβ)田抑制凋亡刺激诱导非小细胞肺癌细胞死亡的分子机制。方法免疫荧光及western blotting分析细胞内源ERβ的线粒体定位;检测顺铂与十字袍碱(staurosporine, STS )处理过表达或沉默线粒体ERβ后细胞凋亡的变化;免疫共沉淀和western blotting分析线粒体ERβ与促凋亡蛋白Bad的相互作用。结果ERβ存在于A549及201T细胞的线粒体中;过表达或沉默ERβ可以显著减少或增加顺铂与STS诱导的Bax激活及细胞凋亡;线粒体ERβ与促凋亡蛋白Bad相互作用可能阻抑Bax的活化及线粒体转位。结论线粒体雌激素受体β可以通过与Bad相互作用抑制顺铂或STS诱导非小细胞肺癌细胞的凋亡,提示线粒体ERβ可能是治疗非小细胞肺癌的一个新靶点。

submitted time 2017-12-07 From cooperative journals:《南方医科大学学报》 Hits181Downloads122 Comment 0

9. chinaXiv:201711.02681 [pdf]

饲料中狐狸、水貂、貉子和狗源性的五重实时荧光PCR检测方法的建立

刘艳艳; 李会荣; 胡悦; 范阳阳; 李祥明; 谭晴晴; 吴家强; 步迅
Subjects: Biology >> Bioengineering

摘要:为了快速鉴别饲料中的狐狸、水貂、貉子和狗源性成分,根据线粒体16S rDNA种间保守序列,设计合成针对狐狸、水貂、貉子和狗的特异性引物和探针,通过对荧光PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了多重实时荧光PCR方法,在同一PCR反应体系中可以同时完成4种动物源性成分检测。通过对15种其他物种的源性成分的检测,结果表明本试验设计的引物和探针具有很好的物种特异性,且灵敏度高,狐狸、水貂、貉子和狗的DNA检出限为0.01ng。对40份样品检测,其中5份检测出貉子、狐狸和水貂源性成分。结果表明,该方法可以有效的鉴别出饲料中狐狸、水貂、貉子和狗源性成分,同时适用于相关动物产品中

submitted time 2017-11-21 From cooperative journals:《中国生物工程杂志》 Hits298Downloads190 Comment 0

10. chinaXiv:201711.02720 [pdf]

饲料中狐狸、水貂、貉子和狗源性的五重实时荧光PCR检测方法的建立

刘艳艳; 李会荣; 胡悦; 范阳阳; 李祥明; 谭晴晴; 吴家强; 步迅
Subjects: Biology >> Bioengineering

摘要:为了快速鉴别饲料中的狐狸、水貂、貉子和狗源性成分,根据线粒体16S rDNA种间保守序列,设计合成针对狐狸、水貂、貉子和狗的特异性引物和探针,通过对荧光PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了多重实时荧光PCR方法,在同一PCR反应体系中可以同时完成4种动物源性成分检测。通过对15种其他物种的源性成分的检测,结果表明本试验设计的引物和探针具有很好的物种特异性,且灵敏度高,狐狸、水貂、貉子和狗的DNA检出限为0.01ng。对40份样品检测,其中5份检测出貉子、狐狸和水貂源性成分。结果表明,该方法可以有效的鉴别出饲料中狐狸、水貂、貉子和狗源性成分,同时适用于相关动物产品中

submitted time 2017-11-21 From cooperative journals:《中国生物工程杂志》 Hits333Downloads192 Comment 0

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